桦剥管菌产木聚糖酶酶学性质,关于免费桦剥管菌论文范文在这里免费下载与阅读,为您的桦剥管菌相关论文写作提供资料。
桦剥管菌论文参考文献：
【摘 要】本文测定了桦剥管菌（Piptoporus betulinus）在白桦木屑培养基中产木聚糖酶粗酶的部分酶学性质,测定结果为木聚糖酶最适反应温度为50℃,最适反pH值应为5.0.
【关键词】桦剥管菌；木聚糖酶；酶学性质
本文研究了桦剥管菌分泌木聚糖酶的部分酶学性质,希望能为木材腐朽菌降解半纤维素的机制研究提供有用数据.
1.材料和方法
1.1材料
桦剥管菌（P. betulinus）,为非褶菌目多孔菌科剥管菌属.
1.2主要试剂
榉木聚糖、D-木糖、3,5-二硝基水杨酸（DNS）.
1.3实验方法
（1）D-甘露糖标准曲线的绘制.pH 5.0 的NaAC-HAC缓冲液中,用紫外分光光度计在波长540nm处,测D-木糖含量,绘制标准曲线如图1所示.
（2）粗酶液酶活测量方法.在无菌操作条件下,将木屑培养基中桦剥管菌菌丝接种到PDA培养基平板上,培养7-10d；在培养基上钻取2个相同大小菌饼,产酶固体培养基中,23℃培养数天,测定酶活前取出菌饼；向培养中加入5倍质量的蒸馏水,浸泡12h后过滤,滤液于4000 rpm离心10 min,上清液用于木聚糖酶酶活性测定.配制的6.67‰榉木聚糖溶液为底物,pH 5.0 的NaAC-HAC缓冲液中,以DNS为显色剂,用1cm比色皿在分光光度计540nn 处测木聚糖酶降解前后吸光度变化.用已绘制D-木糖标准曲线,计算反应液中粗酶液木聚糖酶的活力.（3）酶学性质测定.在pH 3.0-9.0不同缓冲液条件下,测定木聚糖酶反应最适pH.在4℃条件下,将粗酶液分别于pH 3.0-9.0不同缓冲液中放置1h和24h,测定木聚糖酶酶活,探究pH对酶活稳定性的影响.最适pH条件下,分别测定30℃-90℃不同反应温度时酶活,确定酶反应最适温度.将粗酶液在30℃-90℃不同温度下分别保温1h和24h,在最适pH条件下测定酶活,探究温度对酶活稳定性的影响.
2.结果和分析
2.1酶反应最适pH及pH稳定性
用产酶固体培养基,在人工气候箱中23℃培养桦剥管菌,取第18d菌样,以6.77‰榉木聚糖为底物,检测酶反应最适pH及pH稳定性,结果如图2,pH 4.5-6.0之间酶活力较高,相对酶活大于75%,其最适pH为5.0.在4℃条件下不同pH值缓冲液中,将粗酶液放置1h和24h后测定木聚糖酶残存酶活力,结果如图3,酶pH稳定范围在5.0-6.5之间；粗酶液在此pH范围内放置1h,相对酶活均能保持在80%以上；放置24h后相对酶活均能保持在60%以上,结果说明桦剥管菌木聚糖酶pH稳定性较好.
2.2酶反应最适温度及热稳定性
不同温度下酶活结果如图4所示,50℃时达到最大值酶活.当温度继续升高酶活逐渐下降,在45～65℃之间,桦剥管菌木聚糖酶酶相对较高,温度升到80℃时相对酶活降至20%.不同温浴中放置1h和24h,酶活变化结果如图5.在低于50℃的水浴保温1h后,60℃时残存酶活仍在90%,在低于60℃的水浴保温24h后,测得酶相对活性不低于60%,桦剥管菌木聚糖酶热稳定性较好.
3.结论
以6.77‰榉木聚糖为底物,桦剥管菌（P. betulinus）产其木聚糖酶最适pH为5.0,pH稳定范围在pH 5.0-6.5.木聚糖酶反应最适温度50℃,耐受温度低于60℃,热稳定性较好,适宜在常温条件下贮存.
参考文献
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