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菜豆论文参考文献：
摘 要：以双丰3号菜豆为试验材料,比较了种子消毒方法,筛选了快繁最佳增殖培养基、生根培养基及移栽基质.结果表明,25%次氯酸钠浸泡20 min对菜豆种子消毒效果最好；最佳增殖培养基为MSB5+6-BA 5.0 mg/L,14 d获得再生芽为9.2个/外植体；最佳生根培养基为1/2 MSB5+IBA 0.1 mg/L,生根率达95.3%；最佳移栽基质为草炭∶蘑菇渣等于1∶1,移栽成活率为97%.
关键词：菜豆；消毒；增殖；生根；移栽
菜豆（Phaseolus vulgaris L.）又称四季豆、芸豆、扁豆等,分为食豆和食荚两种类型,菜豆在我国各省市均有栽培,种植范围十分广泛,是我国重要的粮食作物和蔬菜作物.菜豆能为人类提供丰富的蛋白质、碳水化合物、维生素及矿物质等[1],其嫩荚尤其是人们喜食的蔬菜之一.
植物组织培养技术已在许多作物上得到应用,并对农业生产起到巨大的推动作用,但关于菜豆组织培养技术的报道却相对较少[2],主要是由于菜豆组织的再生能力较弱,组织培养难度较大.因此,本试验对菜豆组培快繁技术做了初步研究,为菜豆种质资源保存、种质资源创新、脱毒技术应用、遗传转化以及优良品种快繁等工作提供可以利用的技术平台.
1 材料和方法
1.1 试验材料及时间、地点
供试材料为双丰3号（天津科润蔬菜研究所提供）,试验于2012年1月至2014年6月在天津科润蔬菜研究所组培实验室完成.
1.2 种子消毒
挑选籽粒均匀一致的菜豆种子,放置于玻璃容器内.采用如下4种常见豆类种子消毒方法,并作适当改动.T1：70%乙醇处理3 min,无菌水冲洗3次,25%次氯酸钠溶液浸泡20 min,无菌水洗涤5～6次[3]；T2：25%次氯酸钠处理20 min,无菌水洗涤5～6次[4]；T3：氯气熏蒸6 h[5]；T4：氯气熏蒸12 h[6].
将处理种子的种脐向下接种于萌发培养基（MS[7]+6-BA 0.5 mg/L）中,密封好后放置于培养室中培养,每个处理50粒种子,3次重复,共600粒种子.培养室环境温度为25℃,光照强度为4 000 lx,光周期为16 h光照/8 h黑暗.培养5～6 d即可长出幼苗,供试验备用.
1.3 增殖培养
在超净工作台上,取生长5～6 d的2叶1心的无菌苗,放置于灭菌后的培养皿中,切掉胚根及2片真叶,保留叶柄,作为外植体备用.将处理好的外植体的下胚轴部分插入增殖培养基中,插入深度0.5 cm左右.增殖培养基为MSB5（将MS培养基中的有机成分换成B5培养基的有机成分,其他成分不变,缩写为MSB5）加入不同浓度的6-BA,最终培养基中6-BA浓度分别为0.5、1.0、3.0、5.0 mg/L,每个培养瓶中3个外植体,每个处理10瓶,3次重复,共120瓶.将密封好的培养瓶放置于培养室中培养,培养条件同上.
培养7 d后,再生芽长到2～3 cm切一次,记录再生芽数量；将外植体置于相同培养基中继续培养,14 d后切第二次,记录再生芽数量,最后统计两次再生芽数量,筛选最佳快繁培养基.
1.4 再生芽的生根
切取通过快繁获得的均匀一致的再生植株,插入含有不同浓度IBA的培养基中,基本培养基为1/2 MSB5,IBA浓度分别为0、0.1,0.3、0.5、0.7、1.0 mg/L,每个培养瓶接种再生芽10个,每个处理5瓶,3次重复,共90瓶.10 d后测生根率和生根数量,生根率和生根数量最多的培养基为最佳生根培养基.
1.5 组培苗的移栽
先将生根后的组培苗开盖炼苗3～4 d,后将组培苗连瓶一起放置温室内炼苗3～4 d,炼苗结束后将组培苗取出,在水中除掉根部的培养基,尽量使再生根完整.将完整的组培苗移栽到含有不同比例基质的营养钵中,基质处理分为6种,分别为100%草炭、蛭石、蘑菇渣、草炭+蛭石（1∶1）、草炭+蘑菇渣（1∶1）、蘑菇渣+蛭石（1∶1）,每个处理移栽30株组培苗,移栽完的营养钵放置在有塑料薄膜覆盖的小拱棚内,移栽后前3 d适当向拱棚内喷水,保证拱棚内相对湿度达100%,3 d后逐渐放风直至除掉拱棚,10 d后调查成活率.
2 结果和分析
2.1 种子消毒方法的筛选
由表1可知,将4种消毒方法处理后的种子均无污染,可见4种方法均有较好的消毒效果,但对种子出芽率影响有很大差别.T2处理对发芽率影响最小,该处理下种子发芽率极显著高于其他3个处理,T4处理对种子芽率影响最大,发芽率仅4%,极显著低于其他3个处理.T3、T4均为氯气熏蒸消毒,氯气熏蒸是最近大豆种子消毒采用的方法,用其消毒对菜豆种子伤害较大.本试验结果表明,氯气不适用于菜豆种子消毒,而采用次氯酸钠消毒最佳.
2.2 增殖培养基的筛选
从表2可看出,在本试验范围内,随着培养基中6-BA浓度的增加,再生芽数量不断增加.MSB5+6-BA 5.0 mg/L培养基中再生芽数量在第一次和第二次均最高,显著高于其他培养基,并和MSB5+6-BA 0.5 mg/L培养基达极显著差异水平.第二次再生芽数量均要比第一次略低,但增长趋势和第一次完全一致.两次再生芽数量总和,MSB5+6-BA 5.0 mg/L培养基显著高于其他培养基,并和MSB5+6-BA 0.5 mg/L和MSB5+6-BA 1.0 mg/L培养基达极显著差异水平.从3组数据上看,MSB5+6-BA 5.0 mg/L培养基是最佳的快繁培养基,扩繁系数为9.2个/外植体.
2.3 生根培养基的筛选
从表3可看出,当IBA浓度为0.1 mg/L时生根率最高,达到92.5%,显著高于不加IBA的培养基,其后,随着IBA浓度增加,生根率逐渐下降.从生根数量上看,同样是IBA浓度为0.1 mg/L时最多,达12.3根/株.随着IBA浓度的增加,促进了再生植株基部愈伤组织的产生,抑制了再生植株的生根.综上,最佳生根培养基是1/2 MSB5+IBA 0.1 mg/L.
结论：关于本文可作为相关专业菜豆论文写作研究的大学硕士与本科毕业论文菜豆是什么论文开题报告范文和职称论文参考文献资料。
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