阿尼芬净中间体生物转化工艺,本论文为您写阿尼毕业论文范文和职称论文提供相关论文参考文献，可免费下载。
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摘 要：对放线菌来源的棘白霉素脱酰基酶产生菌ECBN的转化工艺进行研究,通过单菌筛选和转化时间两个方面的优化,确定最佳的转化条件,从而提高转化效率.
关键词：棘白霉素；阿尼芬净；转化效率；优化
棘白霉素类抗生素是21世纪初开发的新型药物,具有全新的作用机理,抗真菌谱较广,对念珠菌属以及曲霉菌属均有效,无交叉耐药性,无因其本身作用机制而引发的明显不良反应,是迄今为止安全性最高的一种抗真菌药物,也是目前用于治疗全身性真菌感染的新型药物.
近年来,棘白霉素类抗真菌药发展迅猛,已有卡泊芬净、米卡芬净、阿尼芬净等多个广谱、低毒、高效的新化合物进入了临床研究,[1-3]作为棘白霉素类抗真菌药物阿尼芬净和米卡芬净,它们的合成过程是将其对应的棘白菌素类母核链接不同的侧链形成,其母核的形成是有对应的前体物质棘白霉素B和脱去侧链产生,因此脱酰基过程对于合成该类药物至关重要,化学方法反应条件剧烈,选择性又差,几乎没办法实现,文献报道可以通过微生物转化完成,所使用的转化菌株有游动放线菌属的菌株,尤其以犹他游动放线菌居多,和链霉菌属的菌株,包括环圈链霉菌与一些未确定种的链霉菌属菌株.
以阿尼芬净中间体ECB为底物,对筛选放线菌来源的棘白霉素脱酰基酶产生菌ECBN的转化工艺进行研究,通过单菌筛选和转化时间两个方面优化,确定最佳的转化条件,从而提高转化效率.
1 实验与方法
1.1 供试菌来源
供试菌来源于本实验室菌种库.
1.2 培养基
种子培养基：蔗糖2%,玉米淀粉2%（糊化）,棉籽饼粉1%,酵母粉1%,碳酸钙0.2%,pH6.5.
发酵培养基：蔗糖3%,棉籽饼粉2%,酵母粉2%,磷酸氢二钾0.05%,氯化钾0.1%,硫酸镁0.1%,碳酸钙0.2%,pH6.5.
1.3 方法
通过单菌分筛,转涂斜面,挑选优势单菌进行摇瓶试验.分别将单菌接种瓶,种瓶装量60mL/500mL瓶,30℃,250rpm摇床培养48h.按10%接种量接入发酵培养基,30℃,250 rpm,摇床培养4天.按2000u添加重含40.8%的ECB底物进行转化试验,定时取样,采用HPLC法测定发酵液效价来判断转化效率的高低.
1.4 HPLC檢测
高效色谱仪：Agilent Technologies 1260 Infinity,色谱柱：xBridge Amide3.5um,流动相：乙腈-水（含7.8g L-1 NaH2PO4,pH3.0）,波长：210 nm,进样量：10μL,流速：1mL min-1,柱温：40℃
2 结果与讨论
将保藏的棘白霉素脱酰基酶产生菌ECBN,涂平板,自然分筛,挑选出30株单菌进行斜面培养,再通过斜面外观,菌液,镜检,选出斜面外观比较饱满,菌液挂壁良好,镜检形态比较舒展的单菌共8株进行转化试验,结果可见表1.由表1可见通过菌种分筛试验,在转化时间相同的情况下,1号单菌与8号单菌转化效率较高.
选取1号单菌进行不同转化时间试验,控制转化18h、21h、24h检测效价,结果可见表2.由表2可见转化时间在21h时,转化效率最高.
通过单菌筛选获得优势单菌1号和8号,通过对1号单菌转化时间的考察,确定最佳转化时间为21小时,从而提高了转化效率.
参考文献：
[1]陈由页,曹国颖,傅做到兴,等.棘白霉素类抗真菌药的研究进展[J].中国新药杂志,2007,16（14）：1082-1087.
[2]叶丽娟,朱辉,田敏.微生物来源的真菌细胞壁抑制剂的研究进展[J].国外医药抗生素分册,2005,26（1）：34-41.
[3]蒋正立,林建群,陈文红.棘白霉素类抗真菌药的研究新进展[J].天津药学,2005,17（5）：62-64.
结论：适合阿尼论文写作的大学硕士及相关本科毕业论文，相关阿尼开题报告范文和学术职称论文参考文献下载。
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