食品卫生检验中沙门菌属LAMP检测方法的应用效果分析,本文是一篇关于沙门论文范文，可作为相关选题参考,和写作参考文献。
沙门论文参考文献：
摘 要： 目的：分析沙门菌属LAMP在食品卫生检验中的应用效果.方法：择取2015年2月-11月的食品标本142份,通过LAMP以及分离培养法对其进行检测与鉴定,对比两组检测结果.结果：通过LAMP检测所得结果中,阳性率显著优于分类培养鉴定结果,数据差异存在统计学意义（P<0.05）;应用LAMP进行检验,可以通过加荧光染料染色法判断结果;LAMP检测时间不超过24h,而分离培养鉴定时间在4d-7d左右.结论：应用LAMP法对食品进行检测,不仅具有较高的沙门菌属阳性率,而且检测周期较短,实际应用价值显著,值得广泛推广.
关键词：食品卫生检验沙门菌属LAMP检测方法应用效果
中图分类号：R446 文献标识码：A文章编号：1003-9082（2016）02-0296-01
沙门菌是诱发人体种类细菌性食物中毒的主要因素.现阶段,检测沙门菌的主要方法为分类培养法,该方法虽然具有较好的准确性,但操作程序十分繁琐,免疫学法并不具较好的敏感度,而PCR虽然具有较高的敏感度以及特异度,但在设备方面具有较高的要求,推广限制较大.LAMP属于新兴核酸扩增法,具有特异性强、快速以及简单等优势.本次试验主要通过对比分析分类培养法与LAMP法在食品沙门菌属方面的检测效果,进而探析LAMP法的应用价值.
一、资料与方法
1.一般资料
择取2015年2月-11月的食品标本142份,其中,有6分生食类蔬菜、8份鲜榨果汁、8份沙拉、10份冰激凌、10份生水产品、20份速冻米面、20份非发酵豆制品、20份熟肉、20份生鲜肉以及20份冷冻生肉.以肠炎沙门菌为参考菌株.
2.检测方法
取25g食品标本置于无菌均质袋内,以拍击式均质器进行拍打,2min后停止,将其置于37℃环境中培养10h,冷冻食品置于45℃环境中解冻15min.
对标本行分离培养法检测：在10mlTTB增菌液中接种1ml增菌后标本,然后置于42℃中对其进行培养,时长为24h.另在101mlSC增菌液中接种1ml增菌后标本,在37℃环境中培养4h.各取1杯增菌液,分别进行XLD平板与BS平板接种,于37℃环境中培养24h.择取3个可疑菌落,进行赖氨酸脱羧酶试验培养基、营养琼脂平板以及TSI接种,于37℃环境中培养24h.如果生化反应与沙门菌特征相符,取出营养琼脂平板中的可疑菌落,通过生理盐水,配制为菌悬液,然后通过微生物鉴定系统进行分析.如果XLD平板、BS平板中不存在可疑菌落,继续将BS平板置于37℃环境中培养24h,如检测仍不存在可疑菌落,则为阴性.
对标本进行LAMP检测：取1ml标本前增菌液,对其进行离心处理,离心率为每分钟10000r,共2min,排除上清提取核酸;另取上清液1l,制成DNA待检模板,对食品标本进行DNA检测,反应后,通过肉眼观察反应液颜色,如果呈现绿色,则为阳性;如果呈棕色,或是无色,则为阴性.
3.观察指标
观察两种检测方法的阳性率.
4.统计学方法
本次实验过程中,以SPSS19.0统计学软件对两种检测方法所涉及数据进行分析.其中计数的资料用n（%）表示,数据的组间比较以χ2进行检验;计量资料用均数±标准差（χ±s）表示,数据的组间比较以T进行检验,P<0.05为统计学差异显著的判定标准.
二、结果
LAMP检测方法的阳性率为11.27%,分离培养法的阳性率为4.23%,数据组间比较差异明显,即P<0.05,详情见表1：
三、讨论
由各种类型沙门菌引发不同形式的野生禽兽、家畜以及人体感染,被统称为沙门菌病.带菌者,或是感染沙门菌人的粪便会在一定程度上污染食物,导致人体食物中毒.沙门菌极易导致人体发生细菌性食物中毒,主要表现有败血症、肠胃炎以及肠伤寒等,而且具有一定的传染性,可以通过消化道致病.LAMP检测法是新兴恒温核酸扩增法,根据靶基因所具有的6个区域,设计出来4种特异引物,通过特定链对DNA聚合酶进行置换处理,然后将其置于恒温条件下45min左右,促使其产生扩增反应.相对比PCR而言,LAMP在模板方面并不存在紫外观察、电泳、温度循环以及热变性等要求,不仅简单快捷,具有非常强的特异性,而且检测范围相对较大,检测灵敏度较好,在实际应用过程中,不需要借助特定仪器设备,便可以实现现场快捷且高通量检测,成本较低,经济性能显著.
细菌分离培养法操作程序较为复杂,检测速度比较缓慢,基本上,需要检测7d后,才能获取阳性结果,而且分离细菌后,还要UI器进行增菌与再分离培养,生化鉴定过程中繁琐,且成本较高,难以实现普及.LAMP可以直接提取前增菌液内的核酸,60min中便可以完成对其的扩增操作,沙门菌属检出时间不会超过24h,效率非常高.不仅如此,应用该方法可以通过肉眼直接观察检测结果,具有非常显著的直观价值与便捷性.
通过本次实验可知,LAMP检测法与分离培养法检测结果的阳性率差异非常显著,LAMP检测阳性率为11.27%,分离培养法检测的阳性率为4.23%,数据比较P<0.05,统计学意义显著.
结语
应用LAMP法对食品进行检测,不仅具有较高的沙门菌属阳性率,而且检测周期较短,实际应用价值显著,值得广泛推广.
结论：关于沙门方面的的相关大学硕士和相关本科毕业论文以及相关沙门论文开题报告范文和职称论文写作参考文献资料下载。
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