荨麻中总黄酮提取和含量测定,本论文为您写荨麻毕业论文范文和职称论文提供相关论文参考文献，可免费下载。
荨麻论文参考文献：
摘 要：本项目对荨麻中药饮片中总黄酮含量进行测定,并对荨麻饮片中黄酮的提取方法进行研究.
关键词：荨麻 总黄酮 紫外分光光度法
荨麻（Nettle）,是一种多年生草本植物.茎高60-100厘米,叶对生,雌雄同株或异株.荨麻广泛分布于亚欧大陆,我国云南中部、贵州、四川东南部、湖北和浙江也有广泛分布.荨麻属多种植物药用 ,为我国常用的民间药和民族药,在汉族、维吾尔族、彝族等多个少数民族中广泛使用,主要用于治疗风湿病、扭伤疼痛及皮肤瘙痒等病.
1.实验方法
1.1 简单回流提取法
精密称取荨麻叶粉末10.OO克,放在圆底烧瓶中,加入150ml95%乙醇,油浴加热,连续回流2小时,放冷、过滤,回收乙醇,将浓缩液用石油醚脱脂3-5次,回收石油醚.再用多倍量的无水乙醇沉淀多糖和蛋白质成分.最后将浓缩液在水浴锅上蒸发到4～7ml时转入到100ml的容量瓶中,用30%乙醇定容到10ml,得样品溶液以备用.
1.2 超声波提取法
精密称取狭荨麻叶粉末10.00克,放在200ml烧杯中,加入150ml95%乙醇,在超声波清洗器上提取45分钟,过滤,回收乙醇,将浓缩液用石油醚脱脂5次,回收石油醚.再用多倍量的无水乙醇沉淀多糖和蛋白质成分.最后将浓缩液在水浴锅上蒸发到4～7ml时转入到10ml的容量瓶中,用30%乙醇定容到10ml,得样品溶液以备用.
1.3 狭叶荨麻中黄酮类成分的定性鉴别
1.3.1 化学法
1.3.2 色谱法（TLC）
1.3.2.1 展开系统.醋酸乙酯：甲醇：水等于4：1：1
1.3.2.2 显色系统.饱和醋酸铅试剂
1.3.2.3 定性鉴别.用微量进样器取1微升样品溶液（超声波提取）于薄层板上,放入已饱和20分钟的展开系统中展开,随行芦丁标准品.当展开距离顶端5cm时取出晾干,以饱和醋酸铅为显色剂显色,于105摄氏度烘烤5分钟.
1.3.2.4 实验结果.薄层板上出现 斑点.
1.4 标准曲线的测定
1.4.1 对照品溶液的制备
精密称取芦丁标准品10mg放入10ml容量瓶中,用95%乙醇定容到10ml,得对照品溶液以备用.
1.4.2 波长的选择
黄酮类化合物和铝盐进行络合反应,在碱性条件下生成红色络合物,将其用紫外分光光度计读取吸光度数值,结果显示510nm处有最大吸收峰,故选择510nm为检测波长[7].
1.4.3 芦丁标准曲线
精密量取0.0ml、0.1ml、0.2ml、0.3ml、0.4ml、0.5ml的1mg/ml的对照品溶液于10ml容量瓶中,分别加入30%乙醇0.5ml、0.4ml、0.3ml、0.2ml、0.1ml、0.0ml.再分别加入5%亚硝酸钠0.5ml,摇匀静置6min,再加5%硝酸铝0.5ml,摇匀静置6min,再加4%氢氧化钠5ml,最后用30%乙醇定容,静置15min.置于玻璃比色皿中,在510nm处测得吸光值.
2.结果和讨论
2.1 精密度试验
精密吸取1mg/ml的对照品液0.2ml于10ml容量瓶中按照标准曲线做法,平行做5个样,RSD等于0.276%,本实验精密度良好.
2.2 重现性试验
精密吸取样品液0.5ml于10ml容量瓶中,按照标准曲线法平行测5个样,求得RSD等于0.280%,可见本实验重现性良好.
2.3 稳定性试验
对照品溶液的稳定性：精密吸取浓度为1mg/ml的对照品0.2ml于10ml容量瓶中,按照标准曲线做法测定.每隔10分钟测一次,共测量1个小时,求得RSD等于0.540%,可见稳定性良好.
样品溶液稳定性：精密吸取样品液0.2ml于10ml容量瓶中,按照标准曲线法做测定,每隔10分钟测量一次,共测1小时,求得RSD等于0.540%,可见稳定性良好.
2.4 加样回收率试验
精密吸取样品液0.02ml和芦丁标准品溶液0.02ml于10ml容量瓶中,按标准曲线法测定,计算公式：回收率等于（测得量-样品含量）/加入量×100%,求得平均回收率为101.8%.
2.5 狭叶荨麻中总黄酮的含量测定
精密吸取样品液0.5ml于容量瓶中,按照标准曲线法进行配制,用紫外可见分光光度计在510nm处测得吸光值.根据回归曲线求的含量.
总黄酮含量测定结果：
结论：
1.本实验对荨麻中药饮片中黄酮类成分进行了定性和定量的分析,定性结果显示荨麻叶中含有黄酮类成分.定量结果显示,用超声波提取测得含量为0.159mg/ml,用加热回流提取法测得含量为0.127.
2.本实验比较了用加热回流提取和超声波提取两种方法对黄酮的提取效率,发现用超声波提取法更加简便,提取时间短,提取效率.
3.用5%的亚硝酸钠,5%的硝酸铝,4%的氢氧化钠显色效果良好,且显色稳定,保证了实验数据的可靠性.
4.黄酮类成分具有多种生物学活性,尤其是抗癌防癌作用明显.本实验证明了荨麻中含有黄酮类化合物,扩展了黄酮类成分的来源,也增加了荨麻资源的利用.
参考文献
[1]中国药品生物制品检验所.中国民族药志（1）[M].北京：人民卫生出版社.
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