橡胶树胶孢炭疽菌P型ATP酶基因CgATPase01敲除表型分析,该文是关于炭疽菌论文范文，为你的论文写作提供相关论文资料参考。
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摘 要 为了了解橡胶树胶孢炭疽菌的一个钙转运P型ATP酶基因CgATPase01的功能,本研究利用Split-marker技术构建敲除载体,通过PEG介导原生质体转化对橡胶树胶孢炭疽菌菌株HBCg01的CgATPase 01基因进行敲除,根据表型变化及致病性检测对其功能进行分析.结果表明：通过Split-marker方法获得了敲除突变体△CgATPase01,表型分析发现该突变体和野生菌株间存在明显差异,病菌气生菌丝的颜色发生了改变,生长速率降低,产孢量下降,对橡胶树叶片的致病性减弱,推测该基因可能在橡胶树胶孢炭疽菌的产孢、生长发育和致病性等方面具有重要作用.本研究结果为进一步研究胶孢炭疽菌P型ATP酶基因功能和病原菌的致病机理奠定了基础.
关键词 胶孢炭疽；P型ATP酶基因；敲除；表型分析
中图分类号 S432 文献标识码 A
Abstract To understand the function of cadmium-translocating P-type ATPase gene CgATPase 01 in Colletotrichum gloeosporioides from rubber tree, the Split-marker strategy was applied to build a knockout cassette. The transformants which knocked out CgATPase 01 gene were obtained through PEG-mediated protoplast transformation. The function of CgATPase 01 gene was analyzed according to the phenotype and pathogenicity detection of the mutant. Results： The mutant of △CgATPase 01 was obtained by Split-Marker method. The phenotypic analysis revealed that there was significant difference between △CgATPase 01 and wild type. The mutant had a slower growth rate on plates, and reduced conidiation compared to the wild-type strain. Additionally, the mutants showed decreased pathogenicity to rubber tree. Therefore the CgATPase 01 gene in C. gloeosporioides plays an important role on conidiation, growth and pathogenicity. This study would lay a foundation for further study on the function of P-type ATPase gene and the pathogenic mechanism in C. gloeosporioides.
Key words Colletotrichum gloeosporioides； P-type ATPase gene； deletion； phenotype analysis
doi 10.3969/j.issn.1000-2561.2017.05.019
炭疽病是橡膠树的重要病害之一,该病于1906年在斯里兰卡首次被发现,之后在世界各大橡胶树种植区相继被报道.中国于1962年在海南国营大丰农场苗圃首次发现炭疽病,现在中国橡胶主要种植区广东、广西、云南和海南等省均有不同程度发生,和 病并称为“两病”,每年都给天然橡胶产业带来了巨大损失.橡胶树炭疽病的病原菌有胶孢炭疽菌（Colletotrichum gloeosporioides）和尖孢炭疽菌（C. acutatum）2种,其中胶孢炭疽菌为主要病原菌[1].
目前,已有许多学者对胶孢炭疽菌致病相关基因开展了大量研究.胶孢炭疽菌侵染植株过程中许多阶段的致病相关基因已经得到了克隆,如孢子附着基质基因chip1[2]、附着胞形成时期的cap3、cap5、cap20、cap22、CUT1以及chip6基因[3-6]、构成细胞骨架的微管蛋白基因[7]、营养阶段的有关基因gln和CgDN24[8]、活体营养阶段CgDN3基因[9]、死体营养阶段的pel、pelB[10]及G蛋白信号调控因子CgRGS2基因[11]等都是病原菌致病性相关基因.PAC1基因表达产物能够调节胶孢炭疽菌对pH的敏感性,PAC1基因的缺失可下调PELB基因表达,降低PELB基因的表达产物裂解酶的产生,进而减弱了炭疽病菌的毒力作用[12].CgATG8是病原真菌细胞自噬过程中的重要基因,该基因缺失后,橡胶树胶孢炭疽菌的致病力丧失,孢子萌发和附着胞的形成延迟[13].P型ATP酶是一类可以被ATP驱动而发生磷酸化的阳离子泵,普遍存在于各种生物中,参和生物体的许多重要过程.根据底物特异性P型ATP酶超级家族可以将其分为5个主要亚家族和10个亚型[14-16].研究表明,在植物病原真菌中,P型ATP酶家族基因除了参和离子运输和细胞信号转导等,部分P型ATP酶还和病原菌的生长发育和致病性相关.
在前期工作中,通过对胶孢炭疽菌（HBCg01）全基因组数据库进行tblastn搜索和候选基因结构域分析及功能预测,获得了一个新的Ca2+转运P型ATP酶候选基因CgATPase 01[17],基因和编码的氨基酸序列和已报道的P型ATP酶都存在明显差异.为了深入了解该基因的功能,本研究采用Split Marker重组技术敲除目的基因CgATPase 01,用PCR和分子杂交方法确认敲除突变体,分析其对菌株产孢量、生长和菌落形态等特征及致病力的影响.研究橡胶树胶孢炭疽菌P型ATP酶不仅有助于了解病原菌的致病机理,而且可为制定病害的有效防治策略提供依据.
结论：适合不知如何写炭疽菌方面的相关专业大学硕士和本科毕业论文以及关于人得了炭疽病的图片论文开题报告范文和相关职称论文写作参考文献资料下载。
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