大白菜抗TuMV分子标记辅助选择技术研,本论文可用于分子标记论文范文参考下载，分子标记相关论文写作参考研究。
分子标记论文参考文献：
究
摘 要：分别以大白菜TuMV国家级抗源材料8407和高感TuMV的核心种质材料冠291为亲本构建分离群体,为验证TuMV抗性基因TuRBCS01两侧紧密连锁的分子标记mBr4055和BrID10723的检测准确率,对上述两个亲本F2代分離群体的107个单株进行自交构建F2∶3家系,并对每个家系的TuMV抗性进行鉴定,以判断原F2单株的TuMV抗性及基因型,同时利用上述两个标记引物对F2代107个单株进行检测,根据检测结果及抗病性鉴定结果计算标记检测的准确率.结果表明,两标记均检测为纯合抗病的株系有22株,其中有2株经抗病性验证为杂合抗病,其余均为纯合抗病,检测准确率为90.9%；两标记均检测为杂合抗病的有48株,经抗病性验证,其中5株为纯合抗病,5株为纯合感病,其余均为杂合抗病,检测准确率为79.2%；两标记均检测为纯合感病的有23株,经抗病性验证,其中4株为杂合抗病,1株为纯合抗病,鉴定准确率为78.3%.上述检测结果为更好地利用标记mBr4055和BrID10723进行分子标记辅助选择奠定了基础.
关键词：大白菜；TuMV；抗性基因；分子标记应用
中图分类号：S634.103.6文献标识号：A文章编号：1001-4942（2017）02-0010-05
大白菜是我国的重要蔬菜,病毒病是危害我国大白菜生产的主要病害,其中,芜菁花叶病毒（Turnip mosaic virus, 简称TuMV）是主要病原[1].传统的大白菜抗TuMV育种方法周期长、效率低、选择准确性差,利用分子标记辅助选择可大大加快育种进程,提高选择效率和准确率.
近年来,国内外已开展了一些和大白菜TuMV抗性相关的分子标记研究.闫瑾琦[2]筛选到2个和大白菜抗TuMV基因紧密连锁的RAPD标记,连锁距离分别为9.5 cM和15.36 cM.韩和平等[3]采用AFLP方法,筛选到2个和大白菜TuMV感病基因紧密连锁的AFLP标记,连锁距离分别为7.5 cM和8.4 cM.张俊华等[4]筛选出2个和大白菜TuMV抗病基因连锁的EST-PCR-AFLP标记,连锁距离均为6.5 cM.张晓伟等[5]采用多模型QTL作图的方法,检测到3个和大白菜抗TuMV相关的QTLs （Tu-1、Tu-2和Tu-3）, AFLP标记E36M47-7 （2.9 cM）、E33M60-5 （0.5 cM） 和E36M59-5 （2.4 cM） 分别和上述三个QTLs连锁.Rusholme 等[6]的研究表明,RFLP标记pN202e1和定位在大白菜4号染色体上的隐性TuMV抗性基因retr01共分离；RFLP标记pO52e2 和 pO85e1和定位在大白菜8号染色体上的显性TuMV抗性基因ConTR01共分离.Qian等[7]报道,Indel标记BrID10694 （0.3 cM）和 BrID101309 （0.6 cM）和大白菜隐性TuMV抗性基因retr02紧密连锁,且分别位于该基因的两侧.Jin等[8]的研究结果显示,SSR标记H132A24-s1 （0.2 cM）和KS10960 （0.6 cM）分别和大白菜显性TuMV抗性基因TuRB07紧密连锁并位于该基因的两侧.本课题组鉴定出了两个大白菜TuMV抗性基因——隐性TuMV抗性基因retr02[9] 和显性TuMV抗性基因TuRBCS01[11],筛选到一个和retr02紧密连锁的SSR标记HCC259（3.8 cM）[12]和9个和TuRBCS01紧密连锁的SSR或InDel标记,其中SSR标记mBr4055和InDel标记BrID10723分别位于TuRBCS01基因的两侧,和该基因的连锁距离分别为0.6 cM和1.3 cM[13].
对分子标记检测准确率的研究,有利于更好地将其用于分子标记辅助选择.Piao等[14]的研究表明,和大白菜抗根肿病基因CRb紧密连锁的共显性标记 TCR01 能够准确鉴定出纯合抗性植株.张晶等[15]利用小麦春化基因特异性标记Vrn-D1对石麦 12 和石家庄 8 号杂交后代 F2∶3株系进行冬、春性鉴定,结果和表型鉴定结果一致.焦荻等[16]利用西瓜抗枯萎病基因SNP标记,对两个四倍体西瓜材料（易感病的 NF3 为受体,抗病的 JH 为供体）回交后自交群体BC1F2代673 个单株进行检测,结果表明,检测到的纯合基因型抗病单株和表型鉴定结果一致.目前,尚未见利用大白菜抗TuMV分子标记进行辅助选择技术研究的报道.
本研究通过构建大白菜抗TuMV材料8407和感病材料冠291的F2∶3家系,对每个F2∶3家系的TuMV抗性进行鉴定,进而判断原F2代单株的TuMV抗性及基因型,结合标记检测结果,对标记检测的准确率进行分析,旨在为利用大白菜TuMV抗性基因TuRBCS01两侧紧密连锁的分子标记进行该基因的辅助选择奠定基础.
1材料和方法
1.1试验材料和毒源
抗病亲本材料为大白菜TuMV国家级抗源材料8407,感病亲本材料为高感TuMV的核心种质材料冠291,以两亲本构建的F2代107个单株及F2代单株自交构建的F2∶3家系为研究对象,用于大白菜TuMV抗性基因TuRBCS01分子标记辅助选择技术研究.
将上述材料播种于直径7～8 cm的营养钵中,选用德国大汉（Klasmann-Deilmann）泥炭营养土育苗培养,人工气候室温度为25℃,湿度40%～60%,光照强度9 000～10 000 lx,光照时间每天11.5 h.
毒源为引自中国农业科学院蔬菜花卉研究所的TuMV-C4株系,接种前一个月在感病材料上繁毒,病叶用于接种亲本对照及试验材料.
1.2基因组DNA提取
采用快捷型植物基因组DNA提取试剂盒对大白菜F2代107个单株样品的基因组DNA进行提取,具体步骤如下：
结论：关于分子标记方面的论文题目、论文提纲、分子标记的原理论文开题报告、文献综述、参考文献的相关大学硕士和本科毕业论文。
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